金斯瑞,助力首例Car-T临床实验中美双报胜利,现向广大老挝赌场客户提供Car-T临床申报用质粒开拓生产老挝赌场在线。我们组建了一支具有GMP生产经验的专业团队;建设了1000平米符合GMP规范的生产车间并配备50L-100L的一次性生物反应器及不锈钢发酵罐;提供一站式质粒开拓老挝赌场在线,从稳定菌种库构建、工艺开拓、方法学开拓验证,稳定性研究等一直到临床实验申报。

老挝赌场报道金斯瑞Car-T用质粒平台_老挝赌场官网资讯【澳博18AoBo.com】

Development Process

菌种库构建

- Cell pool screening
- Cell clone screening
- Cell banking

工艺开拓

- Culture optimization
- Purification optimization
- Small scale production

方法学

- Development
- Validation
- Batch release

规模生产


Manufacture Process

稳定菌种库的构建

金斯瑞拥有全面的稳定菌种库开拓能力,从客户提供的DNA序列开头,通过质粒构建、分子克隆和转染、细胞池筛选,直到筛选出稳定、高表示的单克隆菌株。在确定稳定菌株后,我们将在GMP条件下树立RCB(初级菌种库), MCB (主菌种库)和WCB(工作菌种库)。

工艺开拓

上游培育工艺: 主要是针对Animal-free 培育基、补料选择、添加方式及罐上发酵工艺的开拓和优化。通过DOE设计,对pH、通气及溶氧进行范围操纵,优化培育时间、温度等获得较高的表示水平及发酵稳定性。

下游纯化工艺: 主要是针对上样条件,包括上样体积及层析流速、洗脱程序的优化, 通过DOE设计优化层析柱及层析条件,为客户提供一个稳定的、可反复的、可放大的、经济的纯化工艺流程。

10L工艺小试生产: 依据工艺开拓树立的流程,金斯瑞开展放大至10L小试生产。

方法学开拓验证

符合《细胞治疗老挝赌场线上研究与评价技术指导原则》(试行)规定的分析方法的验证及确认,并树立质粒生产质量放行标准。能够依据项目的特别要求进行定制生产,以满足不同的需求。

参考标准

Cell Back QC Specification
Plasmid identity Restriction enzyme mapping
Sequencing (double strand)
Plasmid yield Spectrophotometric determination
Plasmid genetic stability Segregating analysis
Host Cell Identity 16s rDNA Sequencing
Colony morphology
Gram staining
API 20E
Antibiotic resistance Multiple plates with various antibiotics
Cell Bank Viability CFU/mL plate count analysis
Host Cell Purity Visual observation method
Lytic Phage Contamination Plate bacterial cells on media
Plasmid QC Specification
DNA concentration UV 1mg/ml
Appearance Visual inspection Clear
A260/A280 Absorbance ratio 1.8-2.0
Restriction Digest AGE Consistent
Plasmid Form (% supercoiled) HPLC >90%
Host Protein ELISA < 1%
Host Cell Purity HPLC >90%
Residual E. coli DNA qPCR for host gDNA <0.1%
Residual E. coli RNA HPLC for host RNA <0.1%
Endotoxin PTS <10EU/mg
Mycoplasma PCR Not Detected
Sequencing GMP, incl. documentation Consistent
pH pH meter 7.0-8.5
Sterility USP <71> Sterility Test Not Detected

批次生产及放行

通过与客户确认后,依据工艺开拓树立的流程,参照质量放行标准,金斯瑞开展放大至50L中 试生产,具体流程如下:

  1. 3批50L GMP级别中试生产,在搅拌式不锈钢生物反应器中进行并进行纯化。
  2. 对纯化后质粒进行各项放行检测。

工艺转移,资料撰写与临床申报

专家组及项目治理团队通过提交原料文件,会议及现场沟通等方式完成工艺,质量研究及技术的转移,并提供临床申报指导及原料的撰写,确保临床实验申报胜利。

金斯瑞老挝赌场在线

Service Catalog No Milestone Service Application
临床申报质粒开拓
GMP INDSet™ Plasmid Development
SC2000
  1. Gene synthesis
  2. Cell bank
  3. Process development
  4. Analytical methods development
  5. Pilot manufacture and release
  6. Stability study
  7. Documentation
临床实验申请
GMP质粒生产
GMP-Compliant™ Plasmid Preparation
SC2001
  • 5 mg
  • 10 mg
  • 20 mg
  • 10L batch production (50mg)
  • 20L batch production (100mg)
  • 50L batch production (250mg)
  • 100L batch production(500mg)
临床实验I期
(早期临床实验)

询价和订购

Order by mail 邮箱: gene@genscript.com.cn
Order by phone 电话: 400-025-8686转5820
条评论